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【仪器信息网 行业应用】本方案中,9种生物胺目标组分在0.25-100μg/mL线性范围内目标组分峰面积与浓度线性相关系数均达0.999以上;本方法检出限均<1mg/kg,远小于标准GB/T 23884-2021 《动物源性饲料中生物胺的测定 高效液相色谱法》方法检出限(5mg/kg),方法灵敏;峰面积RSD均在0.2%以内,仪器分析稳定,可准确测定目标组分。
参考标准:GB/T 23884-2021 《动物源性饲料中生物胺的测定 高效液相色谱法》
仪器设备
福立LC5090高效液相色谱仪:
配备在线脱气机、四元低压输液泵、自动进样器、柱温箱、双波长-紫外检测器。
色谱柱:Sunniest C18色谱柱,4.60 mm*250 mm,粒径为5.0 μm
一次性注射器
针头过滤器:0.45μm有机滤膜
抽滤瓶
真空泵
微孔滤膜0.45μm
超声清洗仪
恒温摇床
旋涡混合器
离心机:转速不低于5000r/min
分析天平
移液管(2mL、10mL)或微量注射器(1mL)
一般实验室常用仪器和设备
提取
准确称取鱼粉样品1.0135g,置于50mL棕色离心管中,准确加入10mL高氯酸提取液(0.4mol/mL),漩涡混匀30s,置于摇床上,室温下200r/min振荡10min,于5000r/min离心10min,上清液倒入另—50mL离心管中,残渣再用10mL高氯酸提取液(0.4mol/mL)提取,重复上述操作,合并上清液,备用。
衍生化
准确移取上述上清液1mL,放入10mL棕色容量瓶衍生化中,依次加入200pL氢氧化钠溶液、300pL饱和碳酸氢钠溶液和2mL丹磺酰氯衍生溶液,旋涡混匀,置于恒温摇床上,45℃避光反应45min。加入100μL氨水终止反应,混匀,静置15min,用初始流动相定容至刻度,超声混匀,用0.45μm有机微孔滤膜过滤备用。
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