【仪器仪表网 政策标准】《GB4789.12-2025 产肉毒毒素梭菌及肉毒毒素检验》。本标准与 GB4789.12—2016相比，主要变化如下：
— 修改了标准名称;
— 增加了术语和定义；
— 修改了范围；
— 增加了梭菌实时荧光PCR鉴定方法；
— 修改了设备和材料、培养基和试剂；
— 修改了检验程序、操作步骤、结果与报告及附录。
该标准将于2026-03-02实施，因此，下面小编就该标准的主要修订内容进行新旧版本的对比解读，如下所示：
一修改了标准名称、范围，增加“产肉毒毒素梭菌”的术语定义
标准名称修订：由《食品安全国家标准 食品微生物学检验 肉毒梭菌及肉毒毒素检验》变更为《食品安全国家标准 食品微生物学检验 产肉毒毒素梭菌及肉毒毒素检验》。
范围修订：2016版标准适用于“肉毒梭菌”的检验；2025版标准适用于“产肉毒毒素梭菌”的检验。
新增术语定义“产肉毒毒素梭菌”：革兰氏阳性厌氧杆菌，能形成卵圆形芽孢，一般芽孢会大于菌体、位于次端,在适宜培养条件下能产生肉毒毒素的一类细菌的统称。包含肉毒梭菌(Clostridium botulinum)、丁酸梭菌(Clostridium butyricum)等。
技术意义：由于近年来发现，除肉毒梭菌外，其他梭菌，如E型丁酸梭菌等也可产生肉毒毒素， 并引发食源性肉毒中毒，因此，名称修改后标准适用性范围覆盖肉毒梭菌、丁酸梭菌等产肉毒毒素梭菌检验，更科学更精准。
二增加了梭菌实时荧光PCR鉴定方法
变更内容
2025版标准进一步“增加了梭菌实时荧光PCR鉴定方法”，并在普通PCR部分提供了更详细的基因序列位置信息（GenBank编号）。
技术意义
根据不同梭菌的全基因组序列，建立了梭菌属水平、肉毒梭菌和丁酸梭菌种水平鉴定用荧光PCR方法，实现了对“产肉毒毒素梭菌”的精准菌种鉴定。
针对毒素基因分型检测，可使用环凯肉毒梭菌A/B型毒素基因PCR检测试剂盒（KJD06P）和肉毒梭菌E/F型毒素基因PCR检测试剂盒（KJD07P）。
三培养基和试剂的修改
变更内容
新增生理盐水。
新增哥伦比亚血琼脂培养基。
修改“10%胰蛋白酶溶液”改为“胰蛋白酶：1：250 或 0.25%。
新增10×TAE缓冲液。
技术意义：哥伦比亚血平板结合卵黄琼脂，提高了对各类“产肉毒毒素梭菌”的分离成功率，增强了方法的可靠性。
推荐环凯明胶磷酸盐缓冲液（027143）或其即用成品（C27143D1）、TPGYT培养基基础（027147）或TPGYT肉汤管（C27147G1）、即用型庖肉培养基（含铁粉）（C27140G2）、哥伦比亚血平板 （CP0160）、厌氧卵黄琼脂基础（027165）+50%卵黄乳液（029250）。
四检验程序与操作步骤的变化
变更内容
流程图将固态、半固态、液体样品的肉毒素检验方法合并。
调整了疱肉培养基、卵黄琼脂平板的培养温度从35℃±1℃调整为36℃±1℃，并将疱肉培养基、TPGYT的培养时间在5d培养后培养基无菌生长应延长培养至10d体现在了流程图中。
新增哥伦比亚血琼脂培养基，用于观察肉毒梭菌的菌落形态。
新标准中革兰氏染色和PCR毒素编码基因检测后再进行肉毒素检验和实时荧光PCR，提升检验的精确度，将产肉毒素的梭菌精确到梭菌属和种，不再局限于肉毒梭菌。
技术意义：不同形态的样品检测方法合并后，操作方法更为灵活；培养条件36℃±1℃与其他国家标准的微生物培养温度更为统一。
五结果与报告的
修订：2016版“肉毒梭菌检验结果报告”修订为2025版“产肉毒毒素梭菌检验结果报告”，需报告样品中未检出或检出产某型肉毒毒素的某种梭菌，如：样品中检出产E型肉毒毒素的丁酸梭菌。
技术意义：新增报告不仅能确认样品中是否存在肉毒毒素风险，还能明确产生该毒素的具体菌种和毒素型别，提升溯源价值。
