【仪器仪表网 专题推荐】在冷冻电镜技术中，样品冷冻质量直接决定zui终成像分辨率。投入冷冻法（Plunge Freezing）作为zui常用的冷冻固定技术，以其操作简便、成本低廉的优势，成为单颗粒分析的方法之一。本文分享：冷冻电镜样品投入冷冻技术原理，优缺点分析及适用样品类型。
投入冷冻技术原理
投入冷冻技术通过将样品载网直接投入-196℃的液态乙烷/丙烷中，实现超高速冷却，使样品中的水形成非晶态冰（玻璃态冰）而非破坏性的六方晶冰。
关键步骤：
样品应用：将3-5μL样品滴在电镜载网上
滤纸吸样：用滤纸从边缘吸除多余液体，形成薄液膜
快速投入：机械臂快速将载网投入液态乙烷中
液氮保存：将冷冻后的样品转移至液氮中存储
技术优缺点分析
优势：
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操作简单快速，单个样品仅需几分钟
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成本低廉，无需复杂设备
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能够完美保存表面纳米结构
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适合大批量样品的快速制备
局限性：
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仅能处理＜200nm超薄层样品
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厚样品内部易形成冰晶
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需要优化样品浓度和缓冲条件
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对样品均匀性要求较高
适用样品类型
投入冷冻技术特别适合以下样品：
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病毒颗粒（流感病毒、新冠病毒等）
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蛋白质溶液（膜蛋白、复合体等）
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脂质体及纳米颗粒
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核糖体及其他大分子复合物
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单层细胞及细胞器悬液
