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【仪器网 行业应用】金银花,为忍冬的干燥花蕾或带初开的花,具有清热解毒之功效。本文使用日立Primaide 液相色谱仪和技尔InertSustainSwift C18色谱柱,参照2020药典对金银花的含量和特征图谱进行测定。结果显示:各峰分离度良好,以绿原酸计,其理论塔板数超过 29000,且5次实验重复性良好,日立Primaide高效液相色谱仪结果优异,完全满足药典要求。
实验分析
01实验仪器及耗材
液相色谱仪:日立Primaide
色谱柱:InertSustainSwift C18 5µm 250 × 4.6mm(P/N: 5020-88027)
GL Filter针式过滤器(GLS0604 25mm x 0.22μm Nylon)
GL Vial样品瓶(GLS0008 2mL透明瓶带刻度+ GLS0143红膜白胶垫片)
02溶液配制
对照品溶液的制备:
取绿原酸对照品、3,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸对照品和 4,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加 75%甲醇制成每 1mL 含 0.28mg、0.15mg、44μg 的溶液,即得。
供试品溶液的制备:
取本品粉末(过四号筛)约 0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 75%甲醇 50 mL,称定重量,超声处理(功率 500W,频率 40kHz)30 分钟,放冷,再称定重量,用 75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 2μL,注入液相色谱仪,测定,即得。
【系统适用性要求】理论板数按绿原酸峰计算应不低于 10000。
03色谱条件
色谱柱:InertSustainSwift C18 5µm 250 × 4.6mm(P/N: 5020-88027)
流动相A:乙腈
流动相B:0.1 %磷酸溶液
特征图谱
色谱条件
色谱条件与系统适用性试验除检测波长为240nm外,其他同【含量测定】酚酸类。
溶液配制
参照物溶液的制备:
取绿原酸对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含0.40 mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备:
同【含量测定】酚酸类。
供试品特征图谱中应呈现7个特征峰,与参照物峰相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,应在规定值的±10%之内,保留时间规定值为:0.91(峰1)、1.00[峰2(S)]、1.17(峰3)、1.38(峰4)、2.43(峰5)、 2.81(峰6)、2.93(峰7)。
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